Cara melakukan pencairan siri

Kandungan

• peringkat
• Kaedah 1 Lakukan pencairan yang mudah
• Kaedah 2 Kira faktor pencairan dan kepekatan akhir

Dalam kimia, pencairan terdiri daripada mengurangkan kepekatan penyelesaian yang diberikan. Pengenceran bersiri hanyalah pengencangan berulang penyelesaian asal untuk mempercepatkan faktor pengenceran dengan cepat. Jenis pencairan ini sering dilakukan semasa eksperimen memerlukan penyelesaian yang sangat dicairkan dan ketepatan yang tinggi, seperti yang melibatkan keluk kepekatan pada skala log atau yang membolehkan ketumpatan bakteria dalam media tertentu dikira. Mereka sering dilakukan dalam biokimia, mikrobiologi, farmakologi atau kimia.

peringkat

Kaedah 1 Lakukan pencairan yang mudah

1. 
   

   
   Tentukan cecair pencairan yang betul (atau pelarut). Pemilihan pencairan adalah sangat penting dan bergantung kepada penyelesaian yang anda ingin cair. Pengencer sering disuling air, tetapi tidak sistematik. Oleh itu, dengan penyelesaian yang mengandungi bakteria atau sel, medium budaya digunakan sebaliknya. Untuk pencairan bersiri, pencair yang sama digunakan dalam semua tiub.
   • Sekiranya anda tidak pasti untuk kegunaannya, dapatkan bantuan dari orang yang berwibawa atau lihat di Internet untuk apa yang orang lakukan untuk pengalaman yang sama.

2. 
   

   
   Sediakan beberapa tiub ujian yang mengandungi 9 ml cecair pencairan. Tiub ujian ini akan digunakan untuk membuat pencairan berturut-turut. Prinsipnya mudah, anda akan mengambil contoh penyelesaian permulaan dan memindahkannya ke tiub seterusnya, kemudian ambil sampel tiub ini untuk meletakkannya di depan, dan lain-lain.
   • Sebelum memulakan pengenceran, adalah dinasihatkan untuk mengenal pasti terlebih dahulu tiub ujian untuk mengelakkan kekeliruan kemudian.
   • Dalam setiap tiub, anda akan mempunyai kepekatan sepuluh lebih rendah daripada yang sebelumnya. Tiub pertama akan mengandungi larutan dicairkan pada kesepuluh, kedua, seratus, ketiga, seribu, dan sebagainya. Tentukan lebih awal bilangan pelarut untuk mengelakkan membuat lebih banyak tiub daripada yang diperlukan dan pencairan bahan buangan yang tidak perlu.

3. 
   

   
   
   
   Sediakan tiub ujian dengan penyelesaian ibu anda. Letakkan sekurang-kurangnya 2 ml. Jumlah minimum penyelesaian saham untuk pencairan bersiri adalah satu mililiter. Benarkan 2 ml untuk pencairan kedua mungkin. Ini tiub larutan ibu, anda boleh menandakannya sebagai "SM".
   • Sebelum memulakan pencairan bersiri, campurkan penyelesaian permulaan dengan baik.

4. 
   

   
   Buat pencairan pertama. Paip 1 ml larutan stok ke dalam tiub ujian yang dilabel "SM" dan pindahkan jumlah ini ke dalam tiub ujian berlabel. 1/10 yang sudah mengandungi 9 ml cecair pencairan. Campurkan untuk mendapatkan penyelesaian homogen. Dalam tiub ini, terdapat 10 ml larutan: 1 ml larutan stok dan 9 ml cairan pencairan. Penyelesaian baru ini sepuluh kali kurang tertumpu daripada sebelumnya.

5. 
   

   
   
   
   Lakukan pencairan kedua. Dalam pencairan siri kedua, anda akan menarik 1 ml larutan tiub berlabel 1/10 dan anda akan mencurahkannya ke dalam tiub 1/100 yang sudah mengandungi 9 ml cecair pencairan. Tiub itu 1/10 akan bercampur dengan baik sebelum membuat sampel. Setelah pemindahan selesai, campurkan tabung dengan baik 1/100. Penyelesaian dari tiang bertanda 1/10 adalah 10 kali lebih tertumpu daripada tiub berlabel 1/100.

6. 
   

   
   Ulangi manipulasi ini jika perlu. Prosedur ini boleh diulang sebanyak yang dikehendaki sehingga pencairan yang diinginkan dicapai. Untuk percubaan yang melibatkan lengkung kepekatan, anda boleh mendapatkan satu siri penyelesaian dengan pelarutan kepada unit, kesepuluh (1/10), seratus (1/100) atau seribu (1/1000).

Kaedah 2 Kira faktor pencairan dan kepekatan akhir

1. 
   

   
   Kira nisbah pencairan akhir selepas pencairan bersiri. Nisbah total pencairan diperolehi dengan mendarabkan faktor pencairan dengan sendirinya berulang kali kerana terdapat pencairan. Matematik, formulanya adalah seperti berikut: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_ndengan D_t mewakili jumlah pencairan dan faktor D_n, nisbah pencairan.
   • Oleh itu, mari kita anggap bahawa anda melakukan 1/1 pencairan cecair 4 kali berturut-turut. Dalam formula, gantikan faktor pengenceran dengan nilainya: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10,000
   • Faktor pencairan akhir tiub keempat dalam pencairan bersiri anda ialah 1/10 000. Kepekatan larutan tiub terakhir kini 10 000 kali lebih rendah daripada penyelesaian asal.

2. 
   

   
   Tentukan kepekatan larutan selepas pencairan. Untuk mencari kepekatan akhir penyelesaian selepas pencairan bersiri, anda perlu mengetahui kepekatan bermula. Rumusannya ialah: C_akhir = C_awal/ Adengan C_akhir mewakili kepekatan terminal penyelesaian yang dicairkan, C_awal, kepekatan penyelesaian stok dan D, nisbah pengenceran ditentukan terlebih dahulu.
   • Jadi, jika anda mencairkan penyelesaian sel dengan kepekatan 1,000,000 sel per ml dan nisbah pencairan anda ditetapkan kepada 1,000, apakah kepekatan terakhir sampel yang dicairkan anda?
   • Gunakan formula:
     • C_akhir = C_awal/ A
     • C_akhir = 1 000 000/1 000
     • C_akhir = 1000 sel / ml

3. 
   

   
   Beri perhatian kepada unit yang digunakan. Apabila melakukan pengiraan anda, pastikan selalu menggunakan unit yang sama. Oleh itu, jika anda mula dari kepekatan sel per ml, hasil akhir anda juga akan berada dalam sel per ml. Jika kepekatan awal anda berada dalam bahagian per juta (ppm), kepekatan terakhir anda akan berada dalam bahagian per juta.